骨染色方法有很多種，例如甲苯胺藍法、阿利新藍法、番紅O法、Goldner三色染色法等。Goldner三色染色又稱戈德納三色 染色，與Masson三色染色類似，三色染色通常是指染胞核和能選擇性的顯示膠原纖維和肌纖維。 Goldner三色染色液染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關：分子的大小由分子量來體現，小分子量易穿透結 構致密、滲透性低的組織；而大分子量則只能進入結構疏松的、滲透性高的組織。該染液多用于骨類物質的染色，對細胞染 色效果較好，尤其適用于代謝性疾病(Paget病、骨性營養不良等)的研究，以評估成骨細胞和破骨細胞的活性，并容易辨認 骨髓中的轉移性腫瘤細胞。 

【自備材料】 

1、系列乙醇 

2、蒸餾水

【使用方法】 

1、切片二甲苯脫蠟或脫塑料，乙醇漂洗，入水。 

2、入配制好的Weigert鐵蘇木素染色20～30min。 

3、流水沖洗1min，用酸性分化液迅速分化(一般＜5s)。 

4、流水沖洗5min，蒸餾水稍洗。 

5、入Acid Ponceau染色液染色5min。 

6、在上述過程中按蒸餾水:弱酸溶液=4:1比例配制弱酸工作液，用弱酸工作液洗15～30s。 

7、入Orange G染色液染色，直至Ponceau染色液，一般需要3～10min。 

8、用配制好的弱酸工作液沖洗15～30s。 

9、直接入亮綠染色液中染色5min。 

10、用配制好的弱酸工作液沖洗3次，每次15s。 

11、蒸餾水沖洗，吸干或晾干，無水乙醇快速脫水，中性樹膠封固。

【染色結果】

礦化骨 綠色 類骨質 橙色-紅色 軟骨 紫色 細胞核 藍色-灰色

【注意事項】 

1、切片脫蠟應盡量干凈。固定起著重要的作用，使用不同的固定液可延或縮短染色時間。 

2、取A1、A2等量混合即為Weigert鐵蘇木素染液，一般24h失去染色力。 

3、酸性分化時間應根據切片厚薄、組織的類別和新舊而定。 

4、弱酸溶液可使色彩更清晰鮮艷，如使用量大可自行配制0.1～1%乙酸溶液予以替代。 

5、Orange G染色液染色時在鏡下控制，以麗春紅脫去為準。

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