circRNA實時定量PCR檢測是高通量篩選后驗證的必選實驗，基于qPCR檢測技術的circRNA表達與差異分析是對測序、芯片 結果的有效補充和驗證。根據circRNA的閉合環形結構，針對其接頭序列設計Divergent primers，能有效與線性RNA區分開 來。引物經過多方面嚴格的驗證，包括qPCR的擴增曲線、溶解曲線、產物的瓊脂糖凝膠驗證、產物的測序驗證，可有效保 障檢測數據的準確性和可靠性，可檢測細胞、組織、血液和外泌體等多種樣本中circRNA差異表達情況。

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